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采集空气中的禽流感病毒用于PCR 分析的方法

发布人:pli 来源: 发布时间:2016-11-29 15:51:56

禽感病毒可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。其中,甲型流感依据流感病毒特征可分为H×N×共135种亚型,H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种。禽甲型流感病毒除感染禽外,还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3,近期报道的为人感染H7N9禽流感病毒。

禽甲型流感病毒颗粒呈多形性,其中球形直径80~120nm,有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(H)和神经氨酸酶(N)蛋白抗原性不同,目前可分为16个H亚型(H1~H16)和9个N亚型(N1~N9)。该病毒为新型重配病毒,其内部两个基因片段来自禽间H7N9病毒,还有6个来源于禽间的H9N2病毒,没有猪的基因片段。

从空气采集禽流感病毒:

准备工作:在采样管中加入15ml TE Buffer ,采样管高压蒸汽灭菌处理

1. 安装好Coriolis μ空气生物采样器(采样管部分清洗及灭菌处理)
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2. 200 L/min采样速率,采集1hr(因病毒颗粒粒径较小,为保证收集有效性,可适当延长采集时间)

3. 浓缩或过滤

4. 抽提RNA,RT-PCR